DNA, MDR, DM, RTG

DNA (overenie rodičovstva - porovnanie DNA-profilov), DM a MDR1

Objednávkový formulár word si môžete stiahnuť  TU

Tlačivo na vyhodnotenie dysplázie bedrových kĺbov si stiahnete TU

Zoznam lekárov oprávnených posudzovať dyspláziu bedrových a lakťových kĺbov nájdete TU

Testy DNA (overenie rodičovstva – porovnanie DNA-profilov), DM a MDR1 sú potrebné na zaradenie psa, alebo suky do chovu. Pre BŠO tieto testy zabezpečuje firma Slovgen. Každý chovateľ zabezpečí odber a testovanie zvieraťa sám. Pred testovaním je potrebné dohodnúť termín v laboratóriu.

www.slovgen.sk

Slovgen s.r.o., Diagnostické laboratórium
ILKOVIČOVA 8
841 04 Bratislava 4
Slovenská Republika
mobil: 0905 550 916

  •  v čase od 8.00 do 15.30
  •  email: bielikova@slovgen.sk,

Niečo o MDR

MDR1-defekt (citlivosť kólií na Ivermectin)tento článok bol preložený z nemčiny z oficiálnej webstránky Inštitútu pre farmokológiu a toxikológiu Univerzity Justa Liebinga v Gießene, ktorý sa zaoberá výskumom MDR1-defektu

  •  Ivermectin-toxicita u kólií
     Už 20 rokov je známe, že niektoré plemená psov, zvlášť kólie, preukazujú nápadnú precitlivelosť proti mnohým liečivým látkam (ako napr. antiparazitiku Ivermectin). V prípade Ivermectinu sa vyskytujú už pri dávkovaní 100-150 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti neurotické symptómy ako pohybové a koordinačné poruchy, trasenie sa, malátnosť, zvracanie, dezorientácia a zvýšené slintanie. Pri orálnej dávke od 200 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti dochádza k upadnutiu do kómy a dokonca k smrti zvieraťa. Avšak nie všetky kólie sú týmto problémom postihnuté a niektoré znesú tak, ako ostatné psie plemená, až 2000 mikrogramov na kilogram telesnej hmotnosti bez klinických príznakov otravy. Genetické pozadie tejto individuálne rozdielnej citlivosti kólií na Ivermectin bolo až takmer doteraz celkom neznáme a bolo objasnené len pred niekoľkými rokmi.
  •  MDR1 a Ivermectin-toxicita
     Objasnenie plemenne špecifickej precitlivenosti na Ivermectin sa vlastne dosiahlo nepriamo, pri pokusoch s myšami, ktorým bol cielene odstránený tzv. MDR1-gén. V priebehu liečenia roztočov u týchto myší Ivermectinom prišlo pri myšiach s genotypom MDR1-/-, ale nie pri heterozygotných myšiach (s genotypom MDR1+/-) a myšiach s normálnym genotypom (MDR1+/+), k početným smrteľným prípadom. V mozgu MDR1-/- myší bola pritom nájdená 87-krát vyššia koncentrácia Ivermectinu v porovnaní s MDR1+/- myšami. Pretože aj u kólií uhynutých na Ivermectin bola preukázaná silná koncentrácia Ivermectinu v mozgu, prišlo sa k domnienke, že aj kólie musia mať nejakú mutáciu v MDR1 géne. Preto sa začalo vo veterinárnej medicíne intezívne pátranie po defekte v MDR1-géne kólií.
  •  MDR1 a farmakokinetika
     MDR1 patrí k rodine tzv. ABC-transportérov (ATP-Binding Cassette-Transporter). MDR1-proteín (označovaný tiež ako P-glykoproteín) je membránový proteín, ktorý pozostáva z 1280 aminokyselín a má viac vnútrobunkových a mimobunkových slučiek. P-glykoproteín bol objavený začiatkom 70-tych rokov v rakovinových bunkách, ktoré boli odolné voči viacerým cytostatikám. Pre tento fenomén bol zavedený pojem multidrug-resistance (mnohopočetná lieková rezidencia) – MDR. Funkcia MDR1-transportérov v endotelových bunkách mozgových vlásočníc na tzv. hematoencefalickej bariére je znázornená na obrázku nižšie. Cudzia látka (napr. Ivermectin), ktorá vnikla z krvi do endotelovej bunky, je spoznaná MDR1-transportérom a transportovaná cez bunkovú membránu naspäť do krvi. Týmto aktívnym transportom je blokovaný prechod cudzích látok do okolitého nervového tkaniva. Tým chráni MDR1-transportér mozog pred zaplavením potencionálnymi škodlivými látkami. Okrem toho tvorí MDR1-transportér účinnú absorbčnú bariéru pre liečivé a škodlivé látky v čreve a hrá významnú rolu pri vylučovaní liekov v pečeni a obličkách. Bez neporušeného MDR1-proteínu prichádza pri veľkom počte liečiv k preťaženiu organizmu príslušnými látkami.
  •  MDR1-mutácia u kólií
     Pred niekoľkými rokmi boli zverejnené MDR1-genetické postupnosti bígla a kólie citlivej na Ivermectin. Medzi oboma postupnosťami sa ukázal malý, ale rozhodujúci rozdiel. Kým u bígla sa mohol tvoriť funkčný MDR1-transportér, u kólie citlivej na Ivermectin chýbali v genetickej postupnosti 4 dusíkaté bázy. Toto vedie k tomu, že syntéza MDR1-proteínu sa zastaví už po približne 10%. Avšak tento prípad nastane iba keď je defekt v MDR1-géne zdedený tak ako z otcovej, ako aj z matkinej strany a teda je homozygotný. Na základe svojej lokalizácie na úseku DNA kódujucom MDR1-proteín je tento defekt označovaný ako nt230(del4) MDR1-mutácia.
  •  Ktoré plemená sú postihnuté?
     V rámci štúdie týkajúcej sa častosti výskytu MDR1-defektu u rôznych plemien psov, boli na Inštitúte pre farmakológiu a toxikológiu, Univerzity Justa Liebinga v Gießene, skupinou, pracujúcou na projekte MDR1-defekt u kólií, testované psy 30 rôznych plemien z 10 európskych krajín. Defekt v MDR1-géne bol nájdený u nasledujúcich plemien: kólia (dlhosrstá a krátkosrstá), šeltia, austrálsky ovčiak, wäller, bobtail a border kólia. Najväčší výskyt jedincov s genotypom MDR1-/- bol u kólií (33%), šeltií (5,7%), austrálskych ovčiakov (6,9%) a border kólií (0,3%). Len heterozygotne (genotyp MDR1+/-) postihnuté jedince sa našli u plemien wäller a bobtail. U týchto dvoch plemien sa ale tiež musí počítať aj s výskytom homozygotnej MDR1-/- mutácie. Doteraz nebola mutácia preukázaná u bearded kólií, avšak nepatrná testovaná vzorka nepripúšťa zatiaľ žiadne definitívne zhodnotenie. V podobnej štúdií v USA bol MDR1-defekt nájdený dodatočne u nasledujúcich plemien: anglický ovčiak, dlhosrstý vipet, McNabov ovčiak a Silken Windhound.
  •  Genotyp MDR1+/+
     Pri ďaleko väčšej časti všetkých vyšetrených jedincov britských pastierskych psov nebol dokázaný žiadny defekt v MDR1-géne. Tieto zvieratá disponujú teda neporušeným MDR1-transportným systémom. Pri podávaní liekov sa preto nemusia robiť žiadne zvláštne bezpečnostné opatrenia. Ani pri tomto genotype však nemôžu byť vylúčené neželané vedľajšie účinky na základe iných príčin (ako napr. alergia).
  •  Genotyp MDR1+/-
     Psy, u ktorých bol dokázaný heterozygotný genotyp MDR+/-, sú tzv. prenášači MDR1-defektu a môžu ho ďalej prenášať na svoje potomstvo. Neželané vedľajšie účinky liekov na základe MDR1+/- genotypu sú nepravdepodobné, nemožno ich ale celkom vylúčiť.
  •  Genotyp MDR1-/-

     Zvláštny pozor je nutné dávať, keď má pes genotyp MDR1-/-. V takomto prípade chýba vo všetkých tkanivách funkčný MDR1-transportný systém a teda liečba určitými liekmi môže spôsobiť značné problémy. Keď však o tom vieme a týchto liekov sa vyvarujeme, môžu tieto psy prežiť normálny život bez akýchkoľvek obmedzení. O zvýšenej náchylnosti týchto psov k vývinu chronických zápaľových ochorení čreva alebo k narušeniu uvoľňovania steroidných hormónov a ich distribúcie orgánom môžeme v súčasnosti len špekulovať.

  •  Problematické lieky pri genotype MDR1-/-

Tieto lieky môžeme rozdeliť do troch kategórií:

  1.  1. Vedecky doložená je u psov s homozygotným MDR1-/- genotypom otrava Ivermectinom, Doramectinom, Moxidectinom a Loperamidom. Preto u týchto psov nesmú byť použité preparáty s týmito účinnymi látkami. Pod to spadajú nasledujúce antiparazitiká: Ivermectin preparáty – Diapec, Ecomectin, Equimax, Eqvalan, Ivomec, Noromectin, Paramectin, Qualimec, Sumex a Virbamec; Doramectin preparát – Dectomax a Moxidectin preparáty – Cydectin und Equest.
     
  2.  2. Pre ďalšie početné lieky (pozri tabuľku nižšie) bola potvrdené vzájomné pôsobenie s MDR1-transportným systémom na zvieracích modeloch v skúmavke (napr. bunkových kulturách) a/alebo na živých zvieratách. Tieto lieky by mali byť použité len pri zvážení prínosov a rizika a pri povšimnutí farmakokinetickej zvlášnosti genotypu MDR-/-. Kvôli absencií funkčného MDR1-transportéra môže ľahko prísť k nevedomému predávkovaniu týmito liekmi. Dávkovanie týchto liekov pre psy s genotypom MDR1-/- by bolo potrebné, ale doteraz nebolo pre žiaden z týchto problematických liekov vypracované.
     
  3.  3. Len pre veľmi málo liekov bola doteraz preskúmaná a potvrdená bezpečnosť liečby aj u kólií citlivých na Ivermectin, respektíve u psov s homozygotným MDR1-defektom. K nim patria zvlášť tri preparáty zo skupiny makrocyklických laktónov: Selamectin preparát Stronghold, Milbemycinoxim preparát Milbemax a Moxidectin preparát Advocate.
  •  Selamectin patrí tak ako Ivermectin do skupiny avermectinov. Využívajú sa na boj s vnútornými a vonkajšimi parazitmi. Dávkovanie Selamectin preparátu Stronghold je stanovené na 6-12 miligramov na kilogram telesnej hmotnosti. Aplikácia musí byť ale prevedená na povrch kože pipetou (tzv. spot-on aplikácia). Bezpečnosť tohto preparátu u kólií citlivých na Ivermectin bola testovaná, pričom neboli spozorované žiadne príznaky otravy. Napriek tomu sa však treba vyvarovať predávkovania nad výrobcom stanovené dávkovanie (6-12 mg/kg). Preparát by nemal byť podávaný orálne a takáto aplikácia vlastne ani nie je dovolená.
  •  Milbemycinoxim, kombinovaný s účinnou látkou Praziquantel, je obsiahnutý v preparáte Milnemax. Dávkovanie odporúčané zo strany firmy, ktorá ho vyrába, je 0,5-2,5 mg Milbemycinoximu na kg telesnej hmotnosti orálne. Kólie citlivé na Ivermectin preukazovali v štúdií od dávkovania 5 mg/kg jasné znaky neželaných vedľajších účinkov (vyčerpanosť, únava, poruchy pohybu a koordinácie, zvýšené slintanie). Na základe toho by mal byť použitý len s veľkou opatrnosťou.
  •  Moxidectin, kombinovaný s účinnou látkou Imidacloprid, je obsiahnutý v preparáte Advocate. Podľa hmotnosti psa je odporúčané dávkovanie 2,5-6,25 mg Moxidectinu a 10-25 mg Imidaclopridu na kg hmotnosti pre miestnu spot-on aplikáciu. Kólie citlivé na Ivermectin znesú až 5-krát vyššiu dávku bez klinických príznakov otravy. Avšak pri orálnom podaní dochádza k ťažkým neurologickým poruchám už pri podaní 40% dávky určenej na spot-on aplikáciu. Orálnemu prijatiu tohto preparátu sa teda preto treba vyvarovať.
  • Diagnostika
  •  Genetický test na odhalenie nt230(del4) MDR1-mutácie sa vykonáva v Inštitúte pre farmakológiu a toxikológiu, Odbore veterinárnej medicíny, Univerzity Justa Liebinga v Gießene. Test ponúka veterinárom, chovateľom a majiteľom psov istý a jednoduchý spôsob ako identifikovať psy citlivé na Ivermectin, ako aj prenášačov tohto defektu. Tento test môže byť vykonaný u všetkých plemien psov a bez obmedzenia veku. Na vyšetrenie je potrebný 1 ml krvi v skúmavke s protizrážanlivou látkou EDTA (etylén-diamino-tetraoctová kyselina), ktorý musí byť odobraný veterinárnym lekárom. Skúmavku s krvou je potrebné poslať v špeciálnej vypchatej obálke, spolu s vyplneným a veterinárnym lekárom potvrdeným formulárom (formulár je k dispozícií v PDF verzii na vytlačenie alebo vo formáte DOC, ktorý vypíšete v počítači a následne vytlačíte) na nasledujúcu adresu:
  •  Institut für Pharmakologie und Toxikologie
    MZI 636, MDR1-Defekt beim Collie
    Frankfurter Str. 107
    35392 Gießen
    Deutschland
  •  Cena testu je 30 Euro (vrátane 16% dane z pridanej hodnoty). Účet a výsledok testu Vám budú poslané spolu. Podľa pravidiel obdržíte výsledok testu v priebehu 14 dní.

Testy je možné realizovať

z krvi psa. Krv je potrebné odobrať u veterinára do skúmavky typu EDTA. Alebo zo steru podnebia sliznice – kefková výterovka

  •  Ak Váš veterinár nemá skúmavky resp. kefku na výtery je možné si tieto objednať priamo v laboratóriu telefonicky, alebo emailom.
  •  U veterinára je ku vzorke potrebné vypísať tlačivo, potvrdiť podpisom a pečiatkou veterinára. Je potrebné, aby žiadanka (objednávka) bola podpísaná aj chovateľom.
  •  Vzorku a žiadanku dobre zabaliť do bublinkatej obálky a prvou triedou poslať na adresu laboratória.
  •  Faktúru Vám laboratórium pošle ešte pred zaslaním výsledkov. V prípade neuhradenia faktúry Vám výsledky nebudú zaslané.
  •  Cena za testy DNA (DNA – overenie rodičov) MDR1 a DM sa pohybuje okolo 90€. Ak budete testy realizovať v laboratóriu www.slovgen.sk môžete si uplatniť zľavu 10% pre klub, po zadani kódu BSO-SK
  •  Ku žiadanke pripojí každý chovateľ testy DNA a MDR1 rodičov testovaného zvieraťa!!!
  •  Chovatelia ktorý majú psov od doleuvedených chovateľov, nemusia prikladať fotokópie testov, pretože tie sa už v laboratóriu nachádzajú.
 Ing. Marcela Hvozdíka – CHS AKBO PARCHOVANY
 Evy a Josefa Vobořilových – CHS ANCILIA
 Ing. Milan Freunda – CHS von Weissen Freund
Návrat hore